非洲豬瘟（簡稱ASF）是由非洲豬瘟病毒感染引起的豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病， 嚴(yán)重危害著全球養(yǎng)豬業(yè)。是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）法定報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病。

1、我國疫情發(fā)生情況（注：截至發(fā)稿日數(shù)據(jù)）

2018年8月3日，一則我國發(fā)生非洲豬瘟的消息傳遍了整個(gè)養(yǎng)豬界。8月3日上午11時(shí)，我國在遼寧省沈陽市沈北新區(qū)確診并報(bào)道了首例非洲豬瘟疫情。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部通報(bào)，8月1日，遼寧省沈陽市沈北新區(qū)某養(yǎng)殖戶的生豬發(fā)生疑似非洲豬瘟疫情，存欄383頭，發(fā)病47頭，死亡47頭。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部接到報(bào)告后立即緊急指導(dǎo)當(dāng)?shù)刈龊酶黜?xiàng)防治工作，并采樣檢測，啟動(dòng)了Ⅱ級(jí)疫情預(yù)警，沈北新區(qū)政府立即發(fā)布封鎖令，劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)，設(shè)立8個(gè)臨時(shí)消毒檢查站，連夜對(duì)疫點(diǎn)、疫區(qū)內(nèi)所有存欄生豬進(jìn)行撲殺和無害化處理，對(duì)疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)進(jìn)行全面徹底消毒。

8月16日下午出現(xiàn)第二例疫情，經(jīng)中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心檢測確認(rèn)，鄭州雙匯食品有限公司屠宰場從黑龍江佳木斯湯原縣鵲立鎮(zhèn)交易市場運(yùn)到的260頭生豬中，有30頭死亡為非洲豬瘟疫情。自2018年8月16日起，鄭州雙匯食品有限公司屠宰場劃定為疫點(diǎn)實(shí)施封鎖，時(shí)間為6周。但在17日20時(shí)，黑龍江省政府召開了關(guān)于非洲豬瘟疫情緊急發(fā)布會(huì)，佳木斯市政府通報(bào)了關(guān)于疑似該市調(diào)出生豬檢出非洲豬瘟的有關(guān)情況。經(jīng)哈獸研采樣檢測結(jié)果表明：佳木斯養(yǎng)豬場不存在非洲豬瘟，也不支持該養(yǎng)豬場為河南省某屠宰場非洲豬瘟疫情的疫源地。

農(nóng)業(yè)農(nóng)村部新聞辦公室8月19日發(fā)布，江蘇省連云港市海州區(qū)發(fā)生一起生豬非洲豬瘟疫情。已啟動(dòng)應(yīng)急機(jī)制，采取封鎖撲殺、無害化處理、消毒等處置措施，禁止所有生豬及易感動(dòng)物和產(chǎn)品運(yùn)入或流出封鎖區(qū)。

8月22日下午3點(diǎn)，經(jīng)中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心確診，浙江省樂清市淡溪鎮(zhèn)樟岙村股份經(jīng)濟(jì)合作社畜牧養(yǎng)殖小區(qū)發(fā)生非洲豬瘟疫情。

基因測序結(jié)果顯示，引起我國本次非洲豬瘟疫情的毒株為基因II型，部分基因序列與格魯吉亞2007株和俄羅斯伊爾庫茨克2017株的相應(yīng)序列完全一致。

這次沈陽市發(fā)生的非洲豬瘟疫情，是我國首次發(fā)現(xiàn)的疫情。疫情發(fā)生后，國務(wù)院和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部高度重視，要求堅(jiān)決防止疫情蔓延擴(kuò)散。

2、非洲豬瘟的流行歷史與分布

1921年，東非國家肯尼亞首次確認(rèn)非洲豬瘟疫情。之后，于1957年傳入歐洲，1971年傳入美洲，2007年，首次傳播至歐亞接壤的格魯吉亞，迅速傳入俄羅斯。2012年，傳入烏克蘭，2013年傳入白俄羅斯。2014年傳入波蘭、立陶宛、拉脫維亞、愛沙尼亞，2016年傳入摩爾多瓦，2017年傳入捷克，羅馬尼亞。2018年8月傳入我國遼寧。據(jù)統(tǒng)計(jì)， 截止到2015年, 全球約有52個(gè)國家發(fā)生過非洲豬瘟疫情或檢測到病毒, 其中包括31個(gè)非洲國家、17個(gè)歐洲國家和4個(gè)拉丁美洲國家。2016年共有10個(gè)國家的多個(gè)地區(qū)發(fā)生非洲豬瘟疫情。根據(jù)OIE通報(bào), 截止2017年10月底, 全球共有11個(gè)國家 (波蘭、拉脫維亞、立陶宛、烏克蘭、俄羅斯、捷克、贊比亞、南非、摩爾多瓦、羅馬尼亞、科特迪瓦) 發(fā)生非洲豬瘟疫情。其中波蘭疫情數(shù)高達(dá)470多起。2018年俄羅斯世界杯在11個(gè)舉辦城市中，在舉辦前的6個(gè)月有3個(gè)城市周邊發(fā)生了14起疫情。在世界杯開始后不到2個(gè)月時(shí)間，就有6個(gè)城市周邊發(fā)生了38起疫情，占俄羅斯全國同期疫情總數(shù)的76%。

3、病原

國際病毒分類委員會(huì) (ICTV) 最新病毒分類第八次報(bào)告中指出, 非洲豬瘟病毒屬于DNA病毒目, 非洲豬瘟病毒科, 非洲豬瘟病毒屬成員，病毒有些特性類似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直徑為175～215納米，呈20面體對(duì)稱，有囊膜。基因組為雙股線狀DNA，大小170～190kb。含有151個(gè)開放閱讀框, 可編碼150～200種蛋白。在豬體內(nèi),非洲豬瘟病毒可分為23個(gè)基因型。非洲豬瘟病毒基因組變異頻繁, 表現(xiàn)出明顯的遺傳多樣性。非洲豬瘟病毒不能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體,因此還沒有對(duì)血清型進(jìn)行分類。非洲豬瘟病毒可在幾種類型的細(xì)胞漿中，尤其是網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞中復(fù)制。該病毒可在鈍緣蜱中增殖，并使其成為主要的傳播媒介。

該病毒為囊膜病毒, 能夠抵抗蛋白酶的作用, 對(duì)乙醚及氯仿等脂溶劑敏感, 但易被胰酶滅活。病毒在p H 4～10的溶液中比較穩(wěn)定, 但對(duì)溫度較敏感, 病毒可在5℃的血清中存活6年, 室溫中可活數(shù)周，56℃加熱70min或60℃加熱30min可使其滅活。許多脂溶劑和消毒劑可以將其破壞。本病毒能從被感染豬之血液、組織液、內(nèi)臟，及其他排泄物中證實(shí)出來。

4、流行病學(xué)

易感動(dòng)物：豬是非洲豬瘟病毒唯一的自然宿主，豬與野豬對(duì)本病毒都系自然易感性的，各品種及各不同年齡之豬群同樣是易感性，其他動(dòng)物不感染該病毒，人工感染白鼠、天竺鼠、兔、貓、犬、山羊、綿羊、牛、馬和鴿等動(dòng)物均未獲成功。

傳播媒介：非洲豬瘟病毒是唯一的蟲媒DNA病毒，幾種軟蜱是非洲豬瘟病毒的貯藏宿主和媒介。因此, 在非洲, 非洲豬瘟病毒在蜱和野豬感染圈中長期存在, 難以根除。一般認(rèn)為，非洲豬瘟病毒傳入無疫地區(qū)都與來自國際機(jī)場和港口的未經(jīng)煮過的感染豬制品或殘羹喂豬有關(guān)，或由于接觸了感染的家豬的污染物，胎兒，糞便，病豬組織，并喂了污染飼料而發(fā)生。發(fā)病率和死亡率最高可達(dá)100%。

5、臨床癥狀

自然感染潛伏期4～19d，往往更短，臨床實(shí)驗(yàn)感染則為2～5d。非洲野豬對(duì)該病有較強(qiáng)的抵抗力, 一般不表現(xiàn)出臨床癥狀, 但家豬和歐洲野豬一旦感染, 則表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀。根據(jù)病毒的毒力、感染劑量和感染途徑的不同, 臨床癥狀存在差異,可表現(xiàn)為最急性、急性、亞急性或隱性感染。

發(fā)病時(shí)體溫升高至41℃，約持續(xù)4d，直到死前48h，體溫始下降為其特征，同時(shí)臨床癥狀直到體溫下降才顯示出來，故與豬瘟體溫升高時(shí)癥狀出現(xiàn)不同，最初3～4d發(fā)熱期間，豬只之食欲，顯出極度脆弱，豬只躺在舍角，強(qiáng)迫趕起要它走動(dòng)，則顯示出極度累弱，尤其後肢更甚，脈搏動(dòng)快，咳嗽，呼吸快約三分之一，顯呼吸困難，漿液或粘液膿性結(jié)膜炎，有些毒株會(huì)引起帶血之下痢，嘔吐，血液變化似豬瘟，從3～5個(gè)病例中，顯示有50%之白血球數(shù)減少現(xiàn)象，淋巴球也同樣減少，體溫升高時(shí)發(fā)生白血球性貧血，至第4d白血球數(shù)便降至40%才不下降，未成熟中性球數(shù)增加也可觀察到，往往發(fā)熱後第7天死亡，或癥狀出現(xiàn)僅1～2天便死亡。

5.1最急性病例：

在發(fā)病幾天內(nèi)即死亡（少于1周）。病豬發(fā)熱，成堆擁擠在一起，除此之外，無其它明顯臨床癥狀。

5.2急性病例：

感染后最初癥狀是高燒（>40℃）伴隨沉郁和食欲下降，并且耳部、腹部和腿部皮膚發(fā)紅，四肢末端、腹部、口鼻部和耳朵等處出現(xiàn)紅疹、嘔吐、發(fā)熱、虛脫、鼻子或直腸出血、出血性休克（鼻分泌物、腹瀉），死前表現(xiàn)呼吸困難（肺水腫造成）。感染后2～10d死亡，流產(chǎn)也是比較常見的癥狀。血液學(xué)檢測會(huì)出現(xiàn)白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞減少等。臨床癥狀出現(xiàn)后7～10d內(nèi)發(fā)生死亡, 死亡率高, 可達(dá)100%。

5.3亞急性病例：

臨床癥狀不明顯，病毒造成血小板減少癥，在感染后20d左右死亡。發(fā)病豬的淋巴結(jié)出血癥狀明顯，同時(shí)肺臟、腎臟、心臟及胃部也有病變和出血癥狀。

亞急性或慢性非洲豬瘟多發(fā)生在非洲以外的地區(qū), 表現(xiàn)為妊娠母豬流產(chǎn), 呼吸改變, 關(guān)節(jié)腫大, 跛行, 皮膚潰瘍, 消瘦, 病死率低。

6、發(fā)病機(jī)理

非洲豬瘟病毒可經(jīng)過口和上呼吸道系統(tǒng)進(jìn)入豬體，在鼻咽部或是扁桃體發(fā)生感染，病毒在扁桃體和下頜淋巴結(jié)的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制，通過淋巴和血液遍布全身，在淋巴結(jié)、骨髓、脾、肺、肝和腎等進(jìn)行第二次復(fù)制。病毒血癥通常在感染后4～8d出現(xiàn)，由于缺乏中和抗體，將持續(xù)數(shù)周或數(shù)月。強(qiáng)毒感染時(shí)細(xì)胞變化較快，在呈現(xiàn)明顯的刺激反應(yīng)前，細(xì)胞都已死亡。弱毒感染時(shí)，刺激反應(yīng)很容易觀察到，細(xì)胞核變大，普遍發(fā)生有絲分裂。發(fā)病率通常在40%～85%之間，死亡率因感染的毒株不同而有所差異。高致病性毒株死亡率可高達(dá)90～100%；中等致病性毒株在成年動(dòng)物的死亡率在20%～40%之間，在幼年動(dòng)物的死亡率在70%～80%之間；低致病性毒株死亡率在10%～30%之間。

7、病理變化

在耳、鼻、腋下、鶥腹、會(huì)陰、尾和腳無毛部分呈界線明顯的紫色斑，耳朵紫斑部分常腫脹，中心深暗色分散性出血，邊緣褪色，尤其在腿及腹壁皮膚肉眼可見到。內(nèi)臟器官廣泛性出血。脾臟腫大、梗死, 呈暗黑色, 質(zhì)地脆弱。淋巴結(jié)腫大、出血, 暗紅色血腫, 切面呈大理石樣。腎臟表面及皮質(zhì)有點(diǎn)狀出血。切開胸腹腔、心包、胸膜和腹膜上有許多澄清、黃或帶血色液體，心內(nèi)膜及漿膜可見斑點(diǎn)狀出血。在腹部內(nèi)臟或腸系膜上表部分，小血管受到影響更甚，于內(nèi)臟漿液膜可見到棕色轉(zhuǎn)變成淺紅色之瘀斑，尤其于小腸更多，直腸壁深處有暗色出血現(xiàn)象。

8、診斷

8.1臨診診斷

非洲豬瘟與豬瘟等其他出血性疾病的癥狀和病變都很相似，比如, 豬瘟、高致病性藍(lán)耳病、豬丹毒和敗血性沙門菌等；另外非洲豬瘟的亞急性型和慢性型在生產(chǎn)現(xiàn)場實(shí)際上是難以區(qū)別的，因而不能根據(jù)臨床癥狀和眼觀病變來判斷是否為非洲豬瘟，必須用實(shí)驗(yàn)室方法才能鑒別。

8.2實(shí)驗(yàn)室診斷

非洲豬瘟的實(shí)驗(yàn)室診斷主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) 、PCR、熒光定量PCR、DNA原位雜交、免疫組織化學(xué)檢測、病毒分離及動(dòng)物接種等多種方法，另外，一些新的方法正在被開發(fā)和評(píng)估，但到目前為止，生產(chǎn)實(shí)際中，應(yīng)用較多的還是Elisa、PCR以及熒光定量PCR等常用方法：

8.2.1  酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)：OIE將ELISA作為診斷非洲豬瘟的首選血清學(xué)方法，應(yīng)用于血清抗體的檢測, 具有操作方便、特異性較好、靈敏度高的特點(diǎn), 適用于大批量樣品的檢測, 國內(nèi)外常用作檢測抗原的蛋白有VP73、VP72、P54、P32和P30等。目前檢測抗體的商品試劑盒有ELISA K3、ELISA ID-VET和ELISA-Svanova，但由于我國之前無非洲豬瘟病例，所以尚無批準(zhǔn)注冊(cè)的非洲豬瘟診斷試劑。

8.2.2 PCR：具有簡單快速、靈敏度高和特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn), 是目前非洲豬瘟病毒最常用的實(shí)驗(yàn)室檢測方法�？梢詸z測出極低含量的非洲豬瘟病毒, 為早期感染的快速診斷提供了有效的分子生物學(xué)檢測方法。多重RT-PCR方法, 還能夠鑒別診斷豬瘟病毒和非洲豬瘟病毒, 可以從臨床樣品 (如抗凝全血、細(xì)胞培養(yǎng)物和組織) 中檢測到病毒, 這為早期快速、特異性診斷非洲豬瘟和豬瘟提供了可靠的方法。

8.2.3 熒光定量PCR：實(shí)時(shí)熒光定量PCR比常規(guī)PCR具有更高的敏感性和特異性, 可同時(shí)快速檢測大批量樣品。

8.3農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范（試行）》中規(guī)定:

血清學(xué)檢測：抗體檢測可采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和間接熒光抗體試驗(yàn)等方法。

血清學(xué)檢測應(yīng)在符合相關(guān)生物安全要求的省級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室、中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心（國家外來動(dòng)物疫病研究中心）或農(nóng)業(yè)部指定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

病原學(xué)檢測：病原學(xué)快速檢測可采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)等方法。

開展病原學(xué)快速檢測的樣品必須滅活，檢測工作應(yīng)在符合相關(guān)生物安全要求的省級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室、中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心（國家外來動(dòng)物疫病研究中心）或農(nóng)業(yè)農(nóng)村部指定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

病毒分離鑒定：可采用細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物回歸試驗(yàn)等方法。

病毒分離鑒定工作應(yīng)在中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心（國家外來動(dòng)物疫病研究中心）或農(nóng)業(yè)部指定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室生物安全水平必須達(dá)到BSL–3或ABSL–3。

目前農(nóng)業(yè)農(nóng)村部確定，必須按照中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心（國家外來動(dòng)物疫病研究中心）研究確定的非洲豬瘟檢測方法開展檢測工作，所需診斷程序、引物等由動(dòng)衛(wèi)中心統(tǒng)一提供。任何單位均不得違規(guī)生產(chǎn)、銷售非洲豬瘟診斷制劑，沒有相關(guān)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室也不得開展非洲豬瘟診斷工作。

9、防控

目前世界范圍內(nèi)尚無有效疫苗預(yù)防非洲豬瘟，市面上更沒有合法生產(chǎn)、銷售的疫苗。所以在該病的防控上，要做到：

加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)，密切配合，依靠科學(xué)，依法防治，群防群控，果斷處置。到達(dá)：及時(shí)發(fā)現(xiàn)，快速反應(yīng)，嚴(yán)格處置，減少損失的目標(biāo)。重點(diǎn)要做好日常的生物安全管理和臨床巡視、診斷。非洲豬瘟病死率高達(dá)100％，無有效治療手段，一旦發(fā)病，必須按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)的《非洲豬瘟疫情應(yīng)急預(yù)案》和《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范（試行）》進(jìn)行封鎖、撲殺等措施，不得進(jìn)行治療。

9.1 在國家層面上，把好國門，嚴(yán)格出入境檢驗(yàn)檢疫。防止新病原的傳入。8月3日22時(shí)，海關(guān)總署公布《關(guān)于加強(qiáng)非洲豬瘟疫情防控工作的警示通報(bào)》，有效期6個(gè)月。具體要求如下：

（1）要加強(qiáng)供港澳活豬管理，指導(dǎo)相關(guān)養(yǎng)殖場做好防范工作，特別是疫情周邊地區(qū)，要高度關(guān)注豬異常發(fā)病死亡等情況，抓好疫情報(bào)告、采樣送檢等工作，嚴(yán)格按照防控要求，科學(xué)有效穩(wěn)妥處置。

（2）要加強(qiáng)對(duì)來自非洲豬瘟疫區(qū)國家(地區(qū))的進(jìn)境寄遞物和旅客攜帶物查驗(yàn)，一旦發(fā)現(xiàn)豬、野豬及其產(chǎn)品，一律作退回或銷毀處理。

（3）要針對(duì)性研究制定非洲豬瘟疫情應(yīng)急處置預(yù)案，加強(qiáng)人員培訓(xùn)和應(yīng)急綜合演練，提高一線海關(guān)關(guān)員對(duì)突發(fā)疫情的早期報(bào)告、鑒別診斷和規(guī)范應(yīng)對(duì)能力。

（4）在途經(jīng)我國或在我國停留的國際航行船舶、汽車、飛機(jī)和火車等運(yùn)輸工具上，如發(fā)現(xiàn)有來自非洲豬瘟疫區(qū)國家(地區(qū))的豬、野豬及其相關(guān)產(chǎn)品，一律做封存處理。其廢棄物、泔水等一律在海關(guān)的監(jiān)督下做無害化處理。

（5）密切關(guān)注境內(nèi)外疫情動(dòng)態(tài)，做好信息收集工作，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)報(bào)送海關(guān)總署動(dòng)植司。

9.2 在國內(nèi)防止疫情的擴(kuò)散，嚴(yán)格遵循《動(dòng)物防疫法》《重大動(dòng)物疫情應(yīng)急條例》《國家突發(fā)重大動(dòng)物疫情應(yīng)急預(yù)案》《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范》和《非洲豬瘟疫情應(yīng)急預(yù)案》等法律法規(guī)，全面監(jiān)測國內(nèi)疫情，規(guī)范疑似疫情的報(bào)告、確診程序，緊急開展流行病學(xué)的調(diào)查，做好疫情的處置，包括及時(shí)對(duì)疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)的劃定和封鎖，對(duì)疫點(diǎn)、疫區(qū)內(nèi)所有存欄生豬的撲殺和無害化處理，對(duì)疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)進(jìn)行全面徹底消毒等，禁止疫區(qū)內(nèi)生豬的調(diào)運(yùn)。對(duì)基層專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行培訓(xùn)，包括生豬的撲殺和無害化處理、不同場景的消毒、樣品的采集和保存運(yùn)輸?shù)燃夹g(shù)。加強(qiáng)宣傳，非洲豬瘟只感染豬，對(duì)人和其他動(dòng)物沒有威脅，所以對(duì)待疫情既要高度重視，也不要引起不必要的恐慌。

9.3 在養(yǎng)豬場層面，做好嚴(yán)格的生物安全措施：嚴(yán)格控制人員、車輛和易感動(dòng)物進(jìn)入養(yǎng)殖場；進(jìn)出養(yǎng)殖場及其生產(chǎn)區(qū)的人員、車輛、物品要嚴(yán)格落實(shí)消毒等措施。盡可能封閉飼養(yǎng)生豬，采取隔離防護(hù)措施，盡量避免與野豬、鈍緣軟蜱接觸。嚴(yán)禁使用泔水或餐余垃圾飼喂生豬。積極配合當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)開展疫病監(jiān)測排查，特別是發(fā)生豬瘟疫苗免疫失敗、不明原因死亡等現(xiàn)象，應(yīng)及時(shí)上報(bào)當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門。

10、疫苗進(jìn)展

10.1滅活疫苗

迄今為止, 采用多種傳統(tǒng)方法制備的非洲豬瘟滅活疫苗均不能對(duì)強(qiáng)毒攻擊提供有效的免疫保護(hù), 包括病毒接種肺泡巨噬細(xì)胞以及感染脾組織后勻漿制備的滅活疫苗。雖然用非洲豬瘟滅活疫苗免疫后可產(chǎn)生高效價(jià)的抗體, 但難以檢測到中和抗體的存在。提示細(xì)胞免疫在ASF疫苗免疫保護(hù)中起重要作用。鑒于現(xiàn)有研究結(jié)果, 采用傳統(tǒng)方法研制有效的非洲豬瘟滅活疫苗困難較大。

10.2減毒活疫苗

根據(jù)減毒活疫苗毒株來源不同, 可將非洲豬瘟減毒活疫苗毒株分為3類:傳代致弱毒株、天然致弱毒株和重組致弱毒株。減毒活疫苗能夠誘導(dǎo)強(qiáng)烈持久的免疫應(yīng)答, 但生物安全是其使用的主要限制因素，采用分子生物學(xué)手段可增強(qiáng)減毒活疫苗的安全性。

10.2.1傳代致弱毒株

非洲豬瘟病毒可經(jīng)過豬骨髓來源細(xì)胞、Vero和COS-1等細(xì)胞系傳代致弱。傳代過程中, 非洲豬瘟病毒致病力逐漸下降, 同時(shí)病毒免疫原性和穩(wěn)定性也隨之下降。由于生物安全原因，傳代致弱毒株的致病性導(dǎo)致此類疫苗的開發(fā)一度受阻。家豬接種完全致弱的ASFV-G毒株后并未獲得相應(yīng)保護(hù)力, 以抵抗母本病毒的攻擊, 表明傳代致弱的非洲豬瘟病毒安全性較差且很難提供較好免疫保護(hù)。

10.2.2 天然致弱毒株

采用天然致弱非洲豬瘟病毒毒株OURT88/3或NH/P68免疫動(dòng)物后, 能誘導(dǎo)產(chǎn)生對(duì)同源強(qiáng)毒株的攻毒保護(hù), 保護(hù)率介于66%～100%。研究表明, 病毒特異性抗體以及CD8+T細(xì)胞在免疫保護(hù)中均起重要作用, 且OURT88/3毒株產(chǎn)生的免疫保護(hù)與病毒特異性IFN-γ產(chǎn)生細(xì)胞呈正相關(guān)性。采用NH/P68免疫后, 豬對(duì)高毒力ASFV/L60感染抵抗力增強(qiáng)。以O(shè)URT88/3免疫并用致病性O(shè)URT88/1毒株進(jìn)行加強(qiáng)免疫后, 可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)非洲豬瘟病毒 I型不同分離毒株的交叉保護(hù), 表明研制具有交叉保護(hù)的非洲豬瘟病毒疫苗是可能的。然而, 天然致弱毒株免疫動(dòng)物后可造成諸多副反應(yīng), 包括肺炎、流產(chǎn)和死亡等,以及存在散毒的可能性等生物安全隱患限制了其在實(shí)際生產(chǎn)中的進(jìn)一步應(yīng)用。

10.2.3 重組致弱毒株

采用分子生物學(xué)方法, 敲除病毒功能基因、病毒毒力基因或者免疫抑制基因, 可降低病毒毒力或增加機(jī)體對(duì)病毒的免疫應(yīng)答, 研制比傳統(tǒng)弱毒疫苗安全性更好且效力更高的基因工程減毒活疫苗。研究表明, 一些缺失某些基因的毒株接種宿主，毒力減弱且可誘導(dǎo)產(chǎn)生針對(duì)同源母本毒株或異源毒株的特異性免疫保護(hù)。

安全性和有效性是影響非洲豬瘟弱毒活疫苗田間應(yīng)用的重要因素,致弱毒株保護(hù)性的強(qiáng)弱、是否有毒力殘留和是否導(dǎo)致持續(xù)感染是弱毒活毒株能否成為候選疫苗毒株的重要決定因素。因此, 還需要進(jìn)一步研究以確定適合的缺失靶基因及其組合, 以研制可誘導(dǎo)保護(hù)性免疫反應(yīng)且沒有相應(yīng)副作用的非洲豬瘟病毒弱毒活疫苗。

10.3病毒活載體疫苗

研究表明, 細(xì)胞免疫和體液免疫在抗非洲豬瘟病毒感染中發(fā)揮作用。有學(xué)者將非洲豬瘟病毒保護(hù)性抗原重組入腺病毒或痘病毒載體,獲得了良好的抗原特異性CTL反應(yīng)，能夠誘導(dǎo)強(qiáng)烈體液免疫反應(yīng)和細(xì)胞免疫應(yīng)答，但上述研究仍需通過攻毒保護(hù)試驗(yàn), 進(jìn)一步驗(yàn)證病毒活載體疫苗在非洲豬瘟疫苗開發(fā)中的可行性。

10.4核酸疫苗

非洲豬瘟核酸疫苗的研究剛剛起步, 通過將編碼病毒主要抗原的基因克隆入真核表達(dá)載體后, 直接導(dǎo)入機(jī)體內(nèi), 在宿主細(xì)胞內(nèi)完成轉(zhuǎn)錄翻譯后產(chǎn)生抗原蛋白, 從而同時(shí)激活體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答。實(shí)驗(yàn)接種非洲豬瘟 DNA疫苗后, 在沒有誘導(dǎo)產(chǎn)生可檢測水平非洲豬瘟病毒抗體的情況下, 能夠使部分動(dòng)物獲得攻毒免疫保護(hù), 表明細(xì)胞免疫在非洲豬瘟病毒疫苗的免疫中起重要作用。

10.5亞單位疫苗

非洲豬瘟亞單位疫苗只包含特定的病毒抗原, 需通過合適抗原傳遞系統(tǒng)免疫動(dòng)物。用重組p30或p54蛋白免疫豬后可以誘導(dǎo)中和抗體的產(chǎn)生, 但不能提供針對(duì)急性非洲豬瘟感染的保護(hù)，但同時(shí)免疫p30和p54蛋白或兩種蛋白的嵌合體可以提供部分保護(hù)。用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)制備的非洲豬瘟病毒結(jié)構(gòu)蛋白p72、p30和p54等, 以蛋白復(fù)合物作為抗原免疫動(dòng)物后仍不能提供有效的免疫攻毒保護(hù), 說明僅僅依靠上述抗原刺激產(chǎn)生的中和抗體很難獲得理想的免疫保護(hù)效果。因此, 需要研究鑒定更多的非洲豬瘟病毒保護(hù)性抗原、開發(fā)新型免疫佐劑以及采用DNA首免蛋白質(zhì)加強(qiáng)免疫策略, 以提高非洲豬瘟基因工程亞單位疫苗的免疫效力。

10.6疫苗展望

我國已發(fā)生非洲豬瘟疫情，研發(fā)安全有效非洲豬瘟疫苗也迫在眉睫。過去的幾十年中, 對(duì)非洲豬瘟疫苗的研究雖取得了較大進(jìn)展,但是所有努力都未能研制出可應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)的疫苗。通過基因重組技術(shù), 獲得安全、高效減毒活疫苗仍是非洲豬瘟病毒疫苗開發(fā)的首選策略。然而, 仍有很多問題需要考慮, 如安全性研究, 以及開發(fā)適合弱毒活疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞系等。研發(fā)可鑒別野毒感染和疫苗免疫的非洲豬瘟亞單位疫苗、病毒活載體疫苗、核酸疫苗、以及復(fù)制缺陷型疫苗也是研發(fā)非洲豬瘟病毒疫苗的重要策略, 尤其是在沒有疫病流行地區(qū)的使用。與減毒活疫苗相比, 這些疫苗的生物安全性有所提高, 但鑒定病毒保護(hù)性抗原, 有效的遞送機(jī)制以及高效的免疫佐劑都需要長期的研究和探索，正所謂任重而道遠(yuǎn)。

11、結(jié)語

這次的非洲豬瘟，可說是來勢(shì)洶洶，三周時(shí)間內(nèi)就發(fā)現(xiàn)4宗病例，沈陽非洲豬瘟疫情的發(fā)生，宣告了中國非洲豬瘟零疫情歷史的結(jié)束。疫情的發(fā)生，既是意料之外也是意料之中，因?yàn)槲覀冊(cè)缇驼J(rèn)識(shí)到我國周邊國家的疫情會(huì)對(duì)我國造成較大的威脅，隨著國際貿(mào)易和旅游的日益增多，生豬和肉品的大量走私，威脅隨著增大。我國對(duì)非洲豬瘟早有防范，自該病2007年傳入俄羅斯以來，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部先后印發(fā)了《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》和《非洲豬瘟疫情應(yīng)急預(yù)案》，在北方邊境省份等高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)多次組織開展應(yīng)急演練，并連續(xù)多年在全國范圍內(nèi)開展監(jiān)測，定期及時(shí)通報(bào)國際上非洲豬瘟的流行動(dòng)態(tài)。今年5月7日，海關(guān)總署與農(nóng)業(yè)農(nóng)村部還聯(lián)合發(fā)布關(guān)于防止匈牙利非洲豬瘟傳入我國的公告，禁止直接或間接從匈牙利輸入豬、野豬及其相關(guān)產(chǎn)品。

在目前對(duì)病原的來源、流行病學(xué)不清晰的情況下。為防止疫情擴(kuò)散，必須加強(qiáng)領(lǐng)導(dǎo)，密切配合，形成多部門聯(lián)動(dòng)機(jī)制，依靠科學(xué)，依法防治，群防群控，果斷處置，建立多道防線和多級(jí)屏障。做到及時(shí)發(fā)現(xiàn)，快速反應(yīng)，嚴(yán)格處置，減少損失。把疫情控制在最小范圍內(nèi)、最短時(shí)間內(nèi)撲滅。