非洲豬瘟的環(huán)境監(jiān)測

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  • 日期: 2019-07-25
  • 來源: 防疫一線

文丨王章權(quán)

監(jiān)測是防控動物疫病的基礎(chǔ),是制定防控建設(shè)的一級依據(jù)。當前非洲豬瘟疫情嚴峻,通過進行豬場環(huán)境的監(jiān)測,可以及時發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟疫情隱患,有效切斷病原傳播途徑,為非洲豬瘟防控決策提供科學依據(jù)。

非洲豬瘟病毒,具有龐大而復雜的基因組,擁有超強的體外生存能力,雖然宿主單一,只感染豬和野豬,但傳播源和傳播途徑都十分復雜。因為非洲豬瘟病毒的這些特點,導致非洲豬瘟的防控工作實施難度大。

能否在感染之前,及時地把非洲豬瘟病毒“揪”出來,是能否有效避免非洲豬瘟病毒侵害的關(guān)鍵之一。在復產(chǎn)方面,豬場能否成功,清場后是否做到全面凈化非洲豬瘟病毒,必須通過全面的環(huán)境監(jiān)測來驗證。

可能受到污染的環(huán)境

非洲豬瘟病毒是唯一的蟲媒DNA病毒,可在鈍緣軟蜱中增殖,并使其成為主要的傳播媒介。同時,它還可通過車、水源、料槽、去勢、器具、軟蜱叮咬等經(jīng)口和呼吸道途徑間接傳播。

發(fā)病豬和帶毒豬是非洲豬瘟病毒的主要傳染源, 病豬各組織器官、體液、各種分泌物、排泄物中均含有高滴度的病毒, 因此病豬的唾液、鼻分泌物、淚液、尿液、糞便、生殖道分泌物以及破潰的皮膚、病豬血液等為主要的傳染源。

非洲豬瘟病毒在環(huán)境中較為穩(wěn)定,在空氣中能保持活性數(shù)日,在血液、糞便和組織中可長期存活,凍肉中存活數(shù)年至數(shù)十年,未熟肉品、腌肉、泔水中可長時間存活。病毒具有明顯耐冷不耐熱的特點,低溫暗室內(nèi)存在血液中之病毒可生存六年,室溫中也可存活數(shù)周。

非洲豬瘟病毒檢測

2019年4月,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布《關(guān)于加強養(yǎng)殖環(huán)節(jié)非洲豬瘟疫情排查的通知》,鼓勵規(guī)模豬場和種豬場開展非洲豬瘟自檢,F(xiàn)階段主流檢測手段有三種:熒光定量PCR檢測、核酸等溫擴增類和快速檢測試紙條。

1.熒光定量PCR檢測

熒光定量PCR檢測的優(yōu)點明顯,敏感度高、準確率高,可用于環(huán)境樣本的檢測,也可多樣品混合檢測。但是同時其缺點也明顯,操作復雜、成本高,需要配備專業(yè)人士和專業(yè)設(shè)備,花費時間也比較長,單個樣本的檢測時間超過一個小時。如果操作失誤,對檢測結(jié)果影響大,同時有可能造成檢測實驗室污染。
由于熒光定量PCR檢測設(shè)備條件的限制,一般只鼓勵具備一定規(guī)模的豬場配置,進行日常篩查工作。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部也鼓勵規(guī)模豬場、種豬場配置檢測儀器設(shè)備,規(guī)范使用經(jīng)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準或經(jīng)中國動物疫病預(yù)防控制中心比對符合要求的檢測方法,自行開展非洲豬瘟檢測,提高排查工作的針對性和有效性。

2.核酸等溫擴增技術(shù)

核酸等溫擴增技術(shù)是一類核酸體外擴增技術(shù),其反應(yīng)過程始終維持在恒定的溫度下,通過添加不同活性的酶和各自特異性引物來達到快速核酸擴增的目的。
核酸等溫擴增技術(shù)是近幾年來興起,能在某一特定的溫度下擴增特定的DNA或者RNA。與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相比,由于不需要升溫降溫,能夠在恒定溫度下實現(xiàn)擴增,對儀器的要求大大簡化,反應(yīng)時間大大縮短,更能滿足快速簡便的需求,具有特異性高、分析速度快、成本低、突變率低的優(yōu)勢。
由于這項技術(shù)所具備的優(yōu)勢,可以實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測,在非洲豬瘟形勢下無疑更有利于不具備構(gòu)建規(guī)范實驗室條件的豬場檢測非洲豬瘟。

3.快速檢測試紙條

快速檢測試紙條操作簡單,成本低,無需配備價格昂貴的設(shè)備,但是準確性不及熒光定量PCR檢測,同時一般只適合用于全血或內(nèi)臟組織等的檢測,需要注意采樣對象和方法。

快速檢測試紙條適合用于豬場進行初步篩查,一般進行多次采樣檢測,一旦檢測到非洲豬瘟病毒陽性,要及早處理懷疑病豬,并盡早將樣本送到實驗室進行確診。

豬場非洲豬瘟病毒監(jiān)測

為及早進行對非洲豬瘟病毒的篩查,避免豬場豬只受到病毒感染,豬場需要對豬場環(huán)境進行監(jiān)測。

針對容易接觸到豬場外部環(huán)境的地方,如豬場大門口、運豬臺、人員進出通道等,需要經(jīng)常性消毒,有條件的豬場,定期抽取環(huán)境樣本進行熒光定量PCR檢測。
一般豬場可以利用快速檢測試紙條,定期對場內(nèi)豬只進行抽查,有異常狀況,迅速進行針對性監(jiān)測。

懷疑發(fā)病,可采集懷疑病豬的血清樣品和病原學樣品,病原學樣品主要包括抗凝血、脾臟、扁桃體、淋巴結(jié)、腎臟和骨髓等。如環(huán)境中存在鈍緣軟蜱,也應(yīng)一并采集。
樣品的包裝和運輸應(yīng)符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《高致病性動物病原微生物菌(毒)種或者樣本運輸包裝規(guī)范》等規(guī)定。規(guī)范填寫采樣登記表,采集的樣品應(yīng)在冷藏密封狀態(tài)下運輸?shù)较嚓P(guān)實驗室。

取樣應(yīng)小心謹慎,并按照適當?shù)姆椒ū苊鈱游镌斐蛇^度的應(yīng)激或傷害,或?qū)Σ蓸尤藛T造成傷害。應(yīng)無菌收集并注意避免交叉污染,并始終使用新的針頭以避免疫病傳播。所有等待檢測的樣品都應(yīng)該被認為有感染性并應(yīng)進行相應(yīng)處理。

根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部要求,經(jīng)養(yǎng)豬場戶自行檢測或獸醫(yī)社會化服務(wù)機構(gòu)受委托檢測為疑似非洲豬瘟病毒核酸陽性的,應(yīng)當依法報告當?shù)匦竽莲F醫(yī)部門,并按要求規(guī)范做好樣品送檢和確診。在樣品確診前,養(yǎng)豬場戶要嚴格做好生豬隔離和風險物品管理,不得擅自處置。

已清場的豬場,如果準備復養(yǎng),必須首先做好全面消毒,然后多處多點抽取環(huán)境樣本送往實驗室,通過熒光定量PCR檢測樣本,確認樣本無病毒存在,再引入哨兵豬進行觀察。哨兵豬飼養(yǎng)不低于45天,而且不得調(diào)出。最后對哨兵豬進行血清學和病原學檢測,確認非洲豬瘟病毒陰性,且觀察期間沒有臨床異常,養(yǎng)殖場才能進行補欄復產(chǎn)。