處理液主要指的是仔豬閹割和斷尾時的漿液性滲出（包含血液和血清）。有研究表明，處理液中PRRSV-RNA的檢出率比血清中高（Lopez et al., 2018）。

介紹

PRRS對美國每年造成的經(jīng)濟損失超過10億美金，打破傳播循環(huán)，生產(chǎn)PRRSV陰性的斷奶豬是PRRS防控和清除的里程碑。

目前美國在繁殖豬群中監(jiān)測PRRSV的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)包括每月從30個隨機選擇的斷奶仔豬（5頭合成一份）中檢測血清樣品中的PRRSV RNA（6個PCR反應(yīng)）。

從仔豬中采集血液十分耗時，需要兩個得到良好培訓(xùn)的人員，并會引起仔豬的應(yīng)激。這些缺點，限制了該方法的使用。

2010年，開始使用口腔液監(jiān)控豬群的健康情況。然后現(xiàn)實中很難采集哺乳仔豬的口腔液。

因此本文主要探索商品化豬群的處理液采集以及其在PRRSV監(jiān)控中的應(yīng)用。

處理液的收集步驟

1、通過將一次性塑料袋放置于干凈的塑料桶中（圖1-1）。

2、然后用一次性紗布（即奶酪布）覆蓋桶的頂部來收集處理液。紗布形成凹陷，用橡皮筋固定于塑料桶上面（圖1-2）。

3、采集仔豬閹割和斷尾的組織，放入紗布，然后將紗布連同組織取下（圖1-3）。

4、 收集處理液（圖1-4），然后將處理液從塑料袋轉(zhuǎn)移到無菌的50毫升錐形離心機塑料管中（圖1-5）。記錄本次處理液來自哪些仔豬。

圖1  處理液的收集步驟（Lopez et al., 2018）

處理液在PRRSV監(jiān)測中的應(yīng)用評估

1、實驗設(shè)計

從四個哺乳到斷奶的豬場采集12組樣品，采樣時間距最近一次PRRS暴發(fā)時間不等，最長的是27周。每一組樣品包含當(dāng)天所有處理仔豬的處理液。30頭仔豬的血液采集自同一群體的病弱和生長過慢的仔豬，包含雄性和雌性。所有樣品都送到愛荷華州立大學(xué)進行常規(guī)的PRRSV的RNA檢測。對處理液和血清中PRRSV進行測序。

2、結(jié)果

每一個實驗組在處理仔豬時（去勢和斷尾）時采集的處理液的體積如表1所示。每一窩的平均的處理液采集量為2.17mL，每頭仔豬的平均采集量是186μL（0.186mL）。

表1 每一個實驗組在處理仔豬時（去勢和斷尾）時采集的處理液的體積（Lopez et al., 2018）

12組處理液樣品中10份為PRRSV陽性（Ct值≥37為陰性）（83.33%），PRRSV陽性樣品的Ct值從22到35不等。對應(yīng)血清中，只有8份是陽性（66.66%）（每一組血清有一個血清集合為陽性，就判定對應(yīng)的組別為PRRSV陽性；每一組包含30頭仔豬，每五份混合為一份）。處理液和血清中PRRSV毒株序列完全相同都為野毒株。

 表2 處理液和對應(yīng)血清樣品中的PRRSV 定量RT-PCR檢測結(jié)果，和PRRS暴發(fā)時間和采樣的間隔時間及全群免疫MLV或者FVE（臨床野毒暴露）的周數(shù)（Lopez et al., 2018）

討論

采集處理液需要十分注意生物安全，不能讓環(huán)境中的物質(zhì)污染處理液。處理液與北美繁殖群標(biāo)準(zhǔn)的PRRSV檢測方法相比檢出率更高，可能與處理液采樣的群體更大更方便相關(guān)。該方法不僅省時，還比標(biāo)準(zhǔn)方法省錢。

每個月進行標(biāo)準(zhǔn)的血清學(xué)方法檢測30頭仔豬的血清需要花150美金，對應(yīng)的處理液可以檢測6次，涵蓋幾百頭仔豬。另外，一個2500頭母豬的豬場，每周斷奶1550頭，產(chǎn)活仔數(shù)大概是1650頭，每周用處理液檢測大概花費100美金（每周四個處理液樣本）。使用北美繁殖群PRRSV檢測標(biāo)準(zhǔn)每周檢測同等規(guī)模的豬只的花費是8250美金（每5份混合在一起，需要330個PCR反應(yīng)，每個25美金）。

無論采取怎樣的采樣策略，更頻繁的檢測更多的豬只能幫助豬場更敏感的檢測PRRSV和其他病原。從而幫助豬場盡快檢測到PRRS的暴發(fā)，在低流行水平檢測到病原，并進行防控。

盡管如此，還需進一步評估處理液檢測PRRSV和其他病原在豬群水平的敏感性。

啟示

1、處理液主要指的是仔豬閹割和斷尾時的漿液性滲出。臨床條件下，豬場工人能很方便的收集處理液。

2、過收集和監(jiān)測處理液，能夠更頻繁的檢測更多的豬只是否感染PRRSV。

3、處理液是疾病檢測系統(tǒng)的重要提升。可以增進PRRSV的防控和清除項目的進展。