中山大學(xué)國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系研發(fā)中心豬病研究室郭春和博士

藍(lán)耳病病毒主要分兩類，高致病性毒株（變異毒株）和經(jīng)典毒株，國內(nèi)還是以高致病性毒株為主，郭春和博士表示，其實(shí)驗(yàn)室檢測到的90%以上都是高致病性毒株。

PRRSV目前的流行特點(diǎn)有：

1、變異非�？欤�不斷出現(xiàn)新的野毒，疫苗效果不理想；

2、NADC30-like在河北、河南、安徽、江蘇等地的發(fā)病率較高，在廣東出現(xiàn)檢測到的案例很少，而且這個毒株的毒力溫和；

3、高明毒株（GM2）、清遠(yuǎn)毒株（QYYZ）這兩個野毒在廣東流行比較廣，約占陽性病例中的20%，毒力強(qiáng)，而且對豬群影響較大。因?yàn)橹辉趶V東地區(qū)多發(fā)，其他地方較少，所以不像NADC30-like那樣被大家所關(guān)注。

郭春和博士實(shí)驗(yàn)室2016年藍(lán)耳GP5測序毒株分布圖

針對要不要免疫、如何免疫、選擇哪種疫苗等問題，業(yè)內(nèi)對藍(lán)耳病存在諸多爭議。郭春和博士表示，之所以存在這樣的狀況，首先是由于PRRSV的特殊性，它是RNA病毒且感染位點(diǎn)特殊。藍(lán)耳病相當(dāng)于人類的艾滋病，感染豬的肺泡巨噬細(xì)胞，破壞機(jī)體的免疫系統(tǒng)�，F(xiàn)在的藍(lán)耳苗大部分是致弱的活病毒，打了之后或多或少會對機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抑制作用，降低如圓環(huán)、豬瘟、偽狂、喘氣苗等其它疫苗的免疫效果。其次，藍(lán)耳疫苗產(chǎn)生抗體慢，病毒血癥時間長。

現(xiàn)在有些豬場打了疫苗以后還是暴發(fā)藍(lán)耳病，就是因?yàn)椴《颈旧淼倪@些特性加上疫苗質(zhì)量、安全性不好等因素，從而產(chǎn)生了應(yīng)激，出現(xiàn)臨床癥狀。因?yàn)槊庖咝Ч�的不理想，有些豬場會疑惑要不要免疫藍(lán)耳苗。對此，郭博士認(rèn)為，藍(lán)耳苗的預(yù)防作用是不可否認(rèn)的，在我國養(yǎng)豬業(yè)目前的大環(huán)境下，一個豬場很難獨(dú)善其身，所以當(dāng)你的豬群不穩(wěn)定時，還是要免疫。

什么是豬群不穩(wěn)定？母豬群流產(chǎn)，配種后80%以上母豬采食量下降，引起在懷孕的不同階段流產(chǎn)，產(chǎn)房仔豬消瘦，保育期多發(fā)呼吸道癥狀、消瘦等等，從母豬群到仔豬到育肥出現(xiàn)一系列癥狀。當(dāng)豬群穩(wěn)定、生物安全到位了，同時是自繁自養(yǎng)、不到外面引種的場，可以過渡，考慮不打，后面做好后備豬馴化即可。

基于藍(lán)耳病毒的這些特點(diǎn)，郭春和博士對其疫苗的使用提出了以下建議：

1、因?yàn)樗{(lán)耳苗對其它疫苗的干擾比較大，所以打了藍(lán)耳苗后至少隔7-15天再打其它疫苗，效果更好。

2、疫苗會存在40天左右的病毒血癥（疫苗毒），所以如果在血液中檢測到有藍(lán)耳病毒，建議去做一下基因測序，判斷是疫苗毒還是野毒之后再作下一步處理。如果是野毒，建議立即淘汰。

3、藍(lán)耳滅活苗雖然安全性好，但效果并不理想。因?yàn)榫蜏缁蠲绾腿醵久邕@兩種疫苗形式來說，弱毒苗本身就比滅活苗效果好，滅活苗免疫劑量大、頻繁免疫、保護(hù)期短。

4、疫苗好壞只是相對的，適合自己的才是最好的。

正確的選擇疫苗的程序是：

（1）母豬分胎次采樣，公豬全部采樣，保育育肥按周齡采樣，通過基因測序找出豬場的優(yōu)勢毒株，比對藍(lán)耳GP5基因，選擇與之同源性最高的疫苗；

（2）、評價疫苗安全性及質(zhì)量的重要指標(biāo)：疫苗毒病毒血癥時間。雖然隨著技術(shù)的發(fā)展，質(zhì)量在不斷提高。但是有些疫苗的安全性比較差，疫苗毒病毒血癥時間長（長達(dá)70天），這是很可怕的事情。所以說確定了同源性高的疫苗株之后，還要注意疫苗的安全性，疫苗病毒血癥時間越短越好。

為何要做測序呢？為何是GP5測序？單純的PCR不能區(qū)分PRRSV是野毒還是疫苗毒。GP5是PRRSV主要的抗原表位決定簇，是一個糖蛋白，位于病毒囊膜表面，能刺激免疫細(xì)胞產(chǎn)生中和抗體，GP5蛋白的同源性越高則中和抗體效果越好。而其它蛋白如M蛋白、N蛋白產(chǎn)生的是沒有中和活性的抗體，這些抗體不能說明對豬群的保護(hù)率。

很多豬場沒有測序的實(shí)驗(yàn)條件，要送去專門的檢測機(jī)構(gòu)，而且里面還涉及一些問題，引物需要與PCR產(chǎn)物一起送檢、PCR產(chǎn)物純度要高等，否則無法順利測出�，F(xiàn)在很多檢測機(jī)構(gòu)檢到藍(lán)耳抗原，但無法測序，或者只有一部分可以測序。郭春和博士的實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用了特殊的引物，采用套式PCR的方法，產(chǎn)物純度高，所以所有樣品都能成功測序。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示套式PCR靈敏度顯著優(yōu)于普通PCR

上圖解釋了，有些豬場同一份樣品送兩個地方檢測，結(jié)果不一樣的原因。郭春和博士實(shí)驗(yàn)室所有檢測引物均為套式PCR，保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性。套式PCR應(yīng)取代普通PCR，是疫病檢測的方向。

2006年發(fā)生的高致病性藍(lán)耳病波及范圍廣、死亡率高，對全國的生豬存欄都造成了影響。郭春和博士認(rèn)為之所以那場高熱病造成這么大的危害，是因?yàn)楫?dāng)時病毒開始變異，出現(xiàn)了高致病性毒株，與經(jīng)典株的差異非常大，相當(dāng)于出現(xiàn)了一個新的病毒，在沒有疫苗、沒有防控經(jīng)驗(yàn)的情況下，讓人束手無策。

現(xiàn)在PRRSV雖然也在變異，但變異程度還不是很大，目前的疫苗有一定的防控效果。并且現(xiàn)在各項(xiàng)技術(shù)都在進(jìn)步，預(yù)警方面也更到位了，大可不必?fù)?dān)心重現(xiàn)2006年的情況。

但我們需要意識到，藍(lán)耳疫苗是把雙刃劍，使用得好，才能達(dá)到預(yù)期的作用，用得不好會適得其反——不斷有新疫苗出來，應(yīng)用到豬場上，導(dǎo)致變異加快，又研發(fā)新的疫苗，如此不斷循環(huán)�，F(xiàn)在有學(xué)校和科研機(jī)構(gòu)針對新毒株在研發(fā)新的疫苗，是否真的應(yīng)該這么做，值得商榷。

歐美國家的藍(lán)耳病沒有我們國家這么嚴(yán)重，其中一個原因就是它們的疫苗單一，政府只批準(zhǔn)1到2個毒株疫苗。而我們國家現(xiàn)在至少8個疫苗毒株29個廠家，選擇性太大，一個豬場可能會使用多種藍(lán)耳苗或者因場間引種，無意間加速了病毒重組變異，使藍(lán)耳病越來越復(fù)雜。所以，我們應(yīng)該學(xué)習(xí)國外的經(jīng)驗(yàn)，把藍(lán)耳苗毒株的數(shù)量控制在一定范圍內(nèi)，否則越想防控反而越防控不了。

現(xiàn)在國家提倡當(dāng)豬群穩(wěn)定時不打藍(lán)耳苗，或者打了藍(lán)耳苗后，豬群的流產(chǎn)、呼吸道癥狀較少，可以慢慢停止免疫，這個方向是對的。

“當(dāng)然藍(lán)耳病最大的問題是基于病毒本身，其特點(diǎn)破壞免疫系統(tǒng)�，F(xiàn)在有研究發(fā)現(xiàn)有些人是天生不感染艾滋病的，因?yàn)樗麄兲焐�缺少感染艾滋病的受體。這也給了我們提示：是否能把豬體內(nèi)感染藍(lán)耳病毒的受體敲除掉？我們實(shí)驗(yàn)室成功繁育了國內(nèi)第2例藍(lán)耳受體敲除豬，目前有三四十頭，數(shù)量國際上是最多的。

現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)這些CD163受體敲除豬不感染藍(lán)耳病毒，更讓我們興奮的是：免疫豬瘟苗后不產(chǎn)生抗體，即可能抗豬瘟病毒”郭春和博士介紹說。

郭春和博士實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目里的藍(lán)耳CD163敲除豬長勢良好

郭春和博士認(rèn)為，除了自繁自養(yǎng)，大部分豬場缺少不了引種這個環(huán)節(jié)，如果引種，一定要隔離馴化，讓新引進(jìn)的豬接觸、適應(yīng)本場的藍(lán)耳毒株，以后就不怕藍(lán)耳感染。具體可以免疫本場使用的疫苗或者使用本場陽性血清馴化，一段時間后檢測不到抗原只有抗體的時候方可進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)。

國外非常注重后備豬的馴化，但馴化方式有點(diǎn)不一樣。他們實(shí)行全進(jìn)全出，分批次飼養(yǎng)，例如將數(shù)次需要引進(jìn)的量一次性引進(jìn)到隔離舍馴化，然后分批次進(jìn)去生產(chǎn)區(qū)。此外，注重生產(chǎn)群的定期監(jiān)測，例如在配懷舍、生產(chǎn)舍、育肥舍等利用麻繩采集豬群唾液，檢測抗原抗體水平，這個方法雖然跟血清樣品的檢出率有一定差別，但操作簡單，可以作為日常管理的一個監(jiān)測手段，以了解群體的整體狀況。

所以，對藍(lán)耳病的防控，后備豬馴化是第一位，其次是毒株的選擇，然后是做好后期監(jiān)測。